電子顯微鏡（EM）的工作流程涵蓋樣本制備、設備調試、成像及數(shù)據(jù)分析四個核心環(huán)節(jié)，每個環(huán)節(jié)均需精細操作以確保圖像質量。
樣本制備是成像的基礎。透射電鏡（TEM）要求樣本厚度低于100納米，生物樣本需通過戊二醛固定、梯度乙醇脫水及環(huán)氧樹脂包埋，再經(jīng)超薄切片機切成納米級切片；金屬樣本則需機械研磨至微米級后，通過離子減薄或電解雙噴法進一步減薄。掃描電鏡（SEM）樣本需保持表面形態(tài)，生物樣本需經(jīng)固定、脫水、臨界點干燥及噴金處理，以增強導電性。
設備調試需在開機后預熱30分鐘，待儀器穩(wěn)定后進行。首先調整電子槍使電子束聚焦于樣本，通過光闌控制束流直徑以平衡分辨率與亮度。隨后，旋轉物鏡和目鏡調焦環(huán)進行焦距調整，確保圖像清晰；根據(jù)樣本特性選擇合適放大倍數(shù)，避免過高導致失真。最后，通過調節(jié)對比度和亮度優(yōu)化圖像質量，移動載物臺使目標區(qū)域位于視野中心。
高清成像階段，需根據(jù)樣本類型選擇成像模式。TEM通過電子穿透樣本形成高分辨率圖像，可觀察細胞內部超微結構；SEM利用二次電子信號呈現(xiàn)樣本表面形貌，適合分析材料表面特征。成像過程中，需實時監(jiān)控圖像質量，適時調整參數(shù)。
數(shù)據(jù)分析環(huán)節(jié)，利用專業(yè)軟件對圖像進行放大、旋轉、測量及三維重建，提取結構參數(shù)與形態(tài)特征，為科研提供量化依據(jù)。
